看看这篇博士论文关于含药血清细胞给药是怎么设计的
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【写在前面】：本期推荐的是由南京中医药大学发布的一篇博士毕业论文，题目是基于活血化瘀法探讨三七粉抗肺癌的机制研究。我们来看看这篇毕业论文中含药血清细胞实验是怎么设计操作的。也是希望通过本文的分享对你在含药血清方面的细胞实验有所启示。
【关于血清】
前期我们发布过介绍含药血清的一篇推文如下：【中草药:一文掌握中药血清药理学、血清药物化学的研究概况及展望】感兴趣可以点击查阅。
这里再介绍下胎牛血清在细胞培养中的作用（源自百度文库）：
1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。
2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。
4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5.起酸碱度缓冲液作用。
6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。
胎牛血清和其他血清之间的差异（源自威正翔禹生物）：
1、内毒素含量极低
2、极利于细胞的生长和传代 ，适合各种细胞培养
3、每个批号血清均具有完整的检验报告
4、七次无菌过滤，最后三次为0.1 m无菌过滤处理
5、进行细菌、真菌、支原体、病毒及病毒抗体检测，符合国际动物协会要求
6、每个批号血清库存量达500-1000升，保证供应充足
可见胎牛血清如果替换成其他的血清或者不加对于细胞的培养可能是不利的。
【博士毕业论文题目及简介】
基于活血化瘀法探讨三七粉抗肺癌的机制研究
【摘要】
其中含药血清部分：
2)三七含药血清低、中、高剂量干预实验:三七含药血清处理后肺癌A549细胞的细胞增殖能力下降、凋亡能力上升,且细胞的增殖能力与凋亡能力改变具有剂量依赖性。荧光定量PCR检测三七含药血清能够下调A549细胞中CTSB mRNA表达,以高剂量组更为明显。
【实验方法部分】
1.含药血清制备和HPLC测定成分
含药血清的备制:选择体重200g左右8周龄Wistar雄性大鼠6只,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司,生产许可证号:SCXK,大鼠饲养在SPF环境中,温度控制在20?25°C,昼夜交替为十二小时,饮食和睡不受限制。对Wistar雄性大鼠按630mg/kg.d的三七粉进行灌胃(参照第四版《药理实验方法学》按照临床成人用量的6.3倍进行计算),每天上午9时和下午4时各灌胃一次。连续灌胃7次后,于末次给药后2h,腹腔注射10%水合氯醛麻醉后,按标准方法进行备制,腹主动脉采血后3000r/min离心10min,分离血清,经56°C、30min灭活处理后,用0.22um微孔滤膜过滤除菌,-80°C冰箱保存备用,1个月内使用。
2.实验分组。
实验分组:共5组,分别为:空白对照组(A549细胞),低浓度三七含药血清干预组(2%三七含药血清+8%胎牛血清)、中浓度三七含药血清干预组(5%三七含药血清+5%胎牛血清)、高浓度三七含药血清干预组(10%三七含药血清)、CTSB干扰组(转染CTSBsiRNA)
3.对细胞增殖的影响。
其他结果部分这里就不展开了，今天主要是看下含药血清实验。
【讨论】
综合上面论述，我们在设计含药血清细胞给药实验方案时，首先需要考虑血清对细胞生长的影响，如果含药血清加入过多可能抑制细胞生长，影响实验（实验前需要确定该含药血清的最大无毒浓度）；其次要设计对照试验，组别设计控制变量，比如空白对照加入空白血清，那给药组也加入相同体积的含药血清，再比如空白组加了胎牛血清，对照组也加入；最后我们要根据自己实验目的去设计实验方案。经过查阅文献，含药血清加药方式目前尚未统一，还亟待一个明确的实验指导原则，期待后续的发布和确定。
在这里小编更倾向于在给药前加入胎牛血清，含药血清和胎牛血清一起加入，含药血清作为一种“药”发挥作用，胎牛血清可以维持细胞生长，防治因胎牛血清或者培养基的问题造成的影响。也是通过这篇文章给大家一些启发，可以作为参考依据，不是准则。
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