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尖锐湿疣的检查诊断方法

2023-06-09 分类:百科

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尖锐湿疣有如何检查?检查尖锐湿疣的方法有哪些?一起来看看尖锐湿疣的检查诊断方法。

1尖锐湿疣的检查诊断方法

尖锐湿疣的6项检查

1、醋酸白试验

用3-5%醋酸外涂疣体2-5分钟病灶部位变白稍隆起,肛门病损可能需要15分钟,这是尖锐湿疣最为常见的一种检查方法,同时患者也可以自己诊断尖锐湿疣。

2、免疫组织学检查

尖锐湿疣的检查是常用过氧化物酶抗过氧化物酶方法(即PAP)显示湿疣内的病毒蛋白,以证明疣损害中有病毒抗原。HPV蛋白阳性时尖锐湿疣的浅表上皮细胞内可出现淡红色的弱阳性反应。

3、组织化学检查

取少量病损组织制成涂片,用特异抗人类乳头瘤病毒的抗体作染色。如病损中有病毒抗原,则抗原抗体结合。在过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP)方法中,核可被染成红色。此法特异性强且较迅速,对诊断有帮助。

4、病毒疣抗体试验

病毒疣抗体试验通俗来讲,就是指抽血化验,在患者血清中检测抗hpv抗体,如抗hpv抗体阳性,说明已感染疣体病毒。尖锐湿疣的诊断》》》6、基因诊断HPV难于用传统的病毒培养及血清学技术检测,主要实验诊断技术是核酸杂交。近年来发展的PCR方法具有特异、敏感、简便、快速等优点,为HPV检测开辟了新途径。

5、病理检查

主要为角化不全,棘层高度肥厚,乳头瘤样增生,表皮突增厚,延长,其增生程度可似假性上皮瘤样。刺细胞和基底细胞并有相当数量的核分裂、颇似AI-G 变。但细胞排列规则,且增生上皮和真皮之间界限清楚。其特点为粒层和刺层上部细胞有明显的空泡形成。此种空泡细胞较正常大,胞浆着色淡、中央有大而圆,深 嗜碱性的核。通常真皮水肿、毛细血管扩张以及周围较致密的慢性炎性浸润。Bushke-loewenstein巨大型尖锐湿疣,表皮极度向下生长,代替了 其下面的组织、易与鳞状细胞相混,故须多次活检,若有缓慢发展之倾向,则为一种低度恶变的过程,即所谓疣状AI-G。

尖锐湿疣的诊断要点

1、本病多见于性生活活跃的青年男女。有不洁性生活史或间接接触感染和配偶尖锐湿疣病史。

2、外阴生殖器或肛周出现柔软增生物,无自觉症状或仅有微痒不适。男性多见于冠状沟、阴茎颈、龟头、包皮内侧;女性多见于阴道口小阴唇内侧、处女膜沟、尿道口两侧隐窝、阴唇后联合和大阴唇。亦可见于男女的尿道口、阴阜、肛周以及女性的阴蒂、阴道内、宫颈口。

3、发生在粘膜部位的疣体表面多为粉红色或灰白色;皮肤部位的疣体表达面多为灰褐色或灰白色。有的疣体表面呈颗粒状或分叶状,伴有少许分泌物。

4、疣体的形态多样,常见的有菜花状、乳头状、鸡冠状、蘑菇状、丘疹状。亦有呈现手指状、条带状、扁平状或不规则状。个别巨大尖锐湿疣可呈拳头状或袋状。一般疣体的基底较小、较窄。

5、醋酸白试验有助于诊断,对疣体不典型者可配合病理活检或PCR检测以确诊。

2尖锐湿疣有哪些检查诊断方法

尖锐湿疣是感染人类乳头瘤病毒(HPV)而引起的一种表皮瘤样增生。尖锐湿疣的诊断多根据皮疹特点、发病部位、发展情况结合可能询及的接触史来判断,但少数病人要进行一些辅助实验来确诊。具体实验诊断方法介绍如下:

一、醋酸白试验

用3-5%醋酸外涂疣体2-5分钟,病灶部位变白稍隆起,肛门病损可能需要15分钟。本试验的原理是蛋白质与酸凝固变白的结果,HPV感染细胞产生的角蛋白与正常的未感染上皮细胞产生的不同,只有前者才能被醋酸脱色。醋酸白试验检测HPV的敏感性很高,它比常规检测观察组织学变化还好。但偶尔在上皮增厚或外伤擦破病例中出现假阳性、假阳性变白迹象显得界限不清和不规则。美国CDC提示,醋酸白试验并不是特异试验,且假阳性较常见。

二、免疫组织学检查

常用过氧化物酶抗过氧化物酶方法(即PAP),显示湿疣内的病毒蛋白,以证明疣损害中有病毒抗原。HPV蛋白阳性时,尖锐湿疣的浅表上皮细胞内可出现淡红色的弱阳性反应。

三、组织化学检查

取少量病损组织制成涂片,用特异抗人类乳头瘤病毒的抗体作染色。如病损中有病毒抗原,则抗原抗体结合。在过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP)方法中,核可被染成红色。此法特异性强且较迅速,对诊断有帮助。

四、病理检查

主要为角化不全,棘层高度肥厚,乳头瘤样增生,表皮突增厚,延长,其增生程度可似假性上皮瘤样。刺细胞和基底细胞并有相当数量的核分裂、颇似AI-G变。但细胞排列规则,且增生上皮和真皮之间界限清楚。其特点为粒层和刺层上部细胞有明显的空泡形成。此种空泡细胞较正常大,胞浆着色淡、中央有大而圆,深嗜碱性的核。通常真皮水肿、毛细血管扩张以及周围较致密的慢性炎性浸润。Bushke-loewenstein巨大型尖锐湿疣,表皮极度向下生长,代替了其下面的组织、易与鳞状细胞相混,故须多次活检。若有缓慢发展之倾向,则为一种低度恶变的过程,即所谓疣状AI-G。

五、基因诊断

迄今,HPV难于用传统的病毒培养及血清学技术检测,主要实验诊断技术是核酸杂交。近年来发展的PCR方法具有特异、敏感、简便、快速等优点,为HPV检测开辟了新途径。

(一)标本的采集及处理

1.标本的采集和预处理:用刮板或生理盐水浸润的棉棒从阴道和宫颈外口取分泌物和细胞。在作细胞学检查的同时,将标本放入5ml含有0.05%硫柳汞的PBS中,用PBS离心(3000g,10min)洗涤2次,沉积细胞重悬于1mlPBS中,取0.5ml细胞悬液抽提。

2.标本核酸的提取:按1体积细胞悬液加10倍体积的细胞裂解液(10mmol/L Tris-HCl,pH 7.4,10mmol/L EDTA,150mmol/L NaCl,0.4%SDS,1.0mg/ml蛋白酶K)37℃下处理过夜;且等体积酚/氯仿(1:1),氯仿/异戊醇(24:1)各抽提2次;加1/10体积3mol/L NaAc(pH 5.2)及2.5倍体积无水乙醇置-20℃ 2h或过夜沉淀DNA;加1体积乙醇洗涤1次;用60μl含RNA酶(100μg/ml)的TE液(10mmol/L Tris-HCl,pH 8.0,1.0mmol/L EDTA)溶解DNA,37℃温育。

(二)PCR扩增

1. 引物设计和合成:HPV基因组可分为早期区(E)和晚期区(L),每区含一系列开放读码框架(ORF)。序列分析表明,各型HPV的非编码区及E1、E6、E7和L1区均有保守序列。Manos等从HPVL1区中选择保守序列设计合成引物MY11和MY09见表1,该引物与HPV 6、11、16、18及33型有互补序列,也可扩增其它型。

反应试剂: DNA聚合酶(2U/ml)、10mmol/L dNTP贮备液(dATP、dCTP、dGTP、dTTP各10mmol/L),10×PCR缓冲液(500mmol KCl、40mmol/L MgCl2、100mmol/L Tris-HCl、pH 8.5),100μmol/L MY11和MY09贮备液,灭菌的玻璃蒸馏器制备的蒸馏水。

扩增方法和程序:以& PCR反应液,用无菌0.5ml硅化塑料离心管为反应管进行扩增反应。

(1)实验前配制预混反应试剂并分装。预混反应试剂包括除标本DNA外的其它各种PCR反应试剂。每支反应管中含有的PCR反应试剂。

(2)各反应管依次加入10μl标本和90μl预混反应试剂。

(3)加入80-100μl石蜡油,在台式离心机上快速离心数秒钟,使各反应试剂收集于油层下。目前,PCR试剂已商品化,反应体积为25μl。使用时只加入标本DNA即可。

(4)将反应管置PCR扩增仪上,循环参数为95℃ 30s,55℃ 40s,72℃ 50s循环35次,最后72℃延伸5min。

4.每次试验应设阳性及阴性对照。以载有HPV的重组质粒(每反应为100pg)或含有HPV的细胞系(如癌ski、HeLa)DNA为阳性对照,以无HPV的人细胞系DNA为阴性对照。

(三)扩增产物的检测和分析

1. 凝胶电泳:扩增反应结束后,取出反应管,冷却至室温,取10μl扩增产物用5%-7%聚丙烯酰胺凝胶或1.5%琼脂糖电泳,溴化乙锭染色,紫外分析仪下分析结果,分子量约为450bp处出现明显的DNA带。

2. 核酸杂交:如果凝胶电泳无清楚的DNA或需确定DNA带的特异性时,可用标记的公用混合探针和(或)型特异探针作Southern吸印杂交、斑点杂交验证。

按照标准方法制32P ATP标记的寡核苷酸探针,需达到约107cpm/pmol特异活性。杂交液中需含有2×106-5×106cpm探针/ml。在55℃缓慢振荡下杂交2-3h,随后于30-55℃下用洗涤液(2×SSC、0.1%SDS)迅速冲洗杂交膜,除去多余探针。然后进行洗膜,其条件依所用探针而异:公用混合探针,55℃洗膜10min;MY12、MY13及MY16探针,56-57℃下10 min,并换液重洗1次;MY14及WD74探针,58-59℃下10min,亦换液重洗1次。

用PCR方法检测HPV比核酸杂交方法优越。其敏感性高,GP-PCR方法以凝胶电泳直接分析结果,可检出标本中200个拷贝的HPV DNA,若以核酸杂交检测PCR产物,敏感性提高,能检出10个拷贝的HPV DNA。

鉴于PCR技术的高度敏感性,以生殖道脱落细胞为检材足以满足试验要求,避免了活检取材、研磨组织繁杂操作。一般情况下,PCR扩增产物经凝胶电泳,观察产生的DNA可直接作出诊断。因此,PCR技术检测HPV实验周期短、简便快速。

3怎么区别诊断尖锐湿疣与扁平湿疣

典型的尖锐湿疣一般不需作实验室检查即可作出诊断。当患者症状不典型,部位不典型,特别是妇女,其阴道口可有类似于尖锐湿疣的假性湿疣,需作实验室检查以明确诊断。

常用的实验室检查有如下的方法:

(1)细胞学检查取阴道、子宫颈等部位的湿疣组织作成涂片,作帕氏染色。在涂片中可以见到两种细胞,一种细胞的核周围有晕环,它占据了细胞浆的大部分,而将细胞浆压缩到边缘呈浓缩状,此种细胞称为空泡化细胞,它来源于浅层的鳞状上皮细胞;另一种细胞称为角化不良细胞,可单个或成堆分布,胞浆呈橙红色至淡黄色,核小而致密。在尖锐湿疣病的的涂片中这两种细胞常可混合存在。

(2)组织病理变化主要为角化不全,棘层高度肥厚,乳头瘤样增生。粒层和棘层上部细胞有明显的空泡形成。棘细胞基底细胞有相当数量之核分裂,颇似癌变,但细胞排裂规则,且增生上皮和真皮之间境界清楚。

(3)组织化学检查取少量病损组织制成涂片,用特异性抗人类乳头瘤病毒的抗体作染色。如果病损中有病毒抗原,则抗原抗体结合,在用过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP)方法中,核可被染成红色。此法特异性强且较迅速,对诊断有帮助。

对尖锐湿疣的实验室检查,目前还很不成熟,组织学检查和组织病理检查都有一定的误诊率,需在条件好的医院检查。

扁平湿疣是二期梅毒的一种皮肤表现,常发生于阴部,肛门等处。尖锐湿疣是由于尖锐湿疣病毒侵犯人体引起的一种皮肤增殖反应,也是一种常见的性病。它们二者形态相似,鉴别诊断十分重要,否则治疗错误,延误治疗。

4诊断尖锐湿疣需注意

诊断过程需注意:

1、珍珠样丘疹病发生于男性的龟头,沿龟头冠状沟有排列整齐的大小一致的珍珠样丘疹。本病病因不明,常见于青年男性。

2、生殖器部位癌边界不清,癌有明显的浸润,常形成溃疡,有时应进行病理组织学检查。

3、假性湿疣又称女性绒毛状小阴唇,在女性的小阴唇上出现鱼卵状、排列规则的增生物。

4、扁平湿疣为梅毒二期皮疹。扁平湿疣基底宽,无蒂,外观扁平,疣面潮湿、光滑。暗视野显微镜检查可找到梅毒螺旋体,梅毒血清反应为阳性。详见梅毒部分。

5、生殖器鲍温样丘疹病本病较少见,主要与人类乳头瘤病毒16型感染有关。表现为生殖器部位多发性棕红色小丘疹,直径2~10mm。临床上很像,但组织学上类似鲍温病的改变。作出这一诊断必须是专科医师。

5如何诊断尖锐湿疣症状

虽然现代科技发达但由于尖锐湿疣的隐蔽性,导致早期癌患病人的症状极不明显,在此,我们提醒广大朋友,即使您没有患病也要引起重视。虽然早期尖锐湿疣病人的症状表现极不明显。专家指出,症状表现不明显不代表没有症状表现,如何诊断其症状?

1、典型皮损为生殖器或肛周等潮湿部位出现丘疹,乳头状、菜花状或鸡冠状肉质赘生物,表面粗糙角化。

2、醋酸白试验阳性,活体检测可见类似糜烂图样,中间鲜红至褐色,四周色泽逐渐减淡。

3、核酸杂交可检出HPV-DNA相关序列,PCR检测可见特异性HPV-DNA扩增区带。

4、患者多有不洁性生活史或配偶感染史,少数尖锐湿疣通过接触污染的用具感染,新生儿亦可通过产道受感染。 潜伏期1~8个月不等,平均为3个月。

5、尖锐湿疣HPV病毒不溶于血液,但可以通过检测血液中血清抗体,来得到感染病毒的信息。通过先进病毒检测系统,能迅速化验血清,检测三项,即“病毒抗体、病毒类型、病毒数量”。

6、尖锐湿疣治疗推荐泌疣清组合,纯中药制剂,三维立体给药方式,彻底根治尖锐湿疣。

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