液相色谱仪检测枸杞中甜菜碱含量的方法
2023-07-03 分类:养生资讯
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一、液相色谱仪检测枸杞中甜菜碱含量的方法原理:
枸杞样品中甜菜碱组分经甲醇溶液提取后,用混合型阳离子固相萃取柱净化,再用乙腈溶液定容,最后用配有紫外检测器的液相色谱在波长205nm处测定,时间定性,外标法定量。
二、液相色谱仪检测枸杞中甜菜碱含量的仪器设备:
1、液相色谱仪:配紫外检测器;
2、分析天平:0.1mg;
3、离心机:4000r/min;
4、涡旋混合器;
5、组织捣碎机;
6、均质器;
7、旋转蒸发仪。
三、液相色谱仪检测枸杞中甜菜碱含量的分析步骤:
1、提取:
称取枸杞干样0.2g或鲜样1g于50ml离心管中,加入25ml甲醇溶液,涡旋混匀1min,再均质提取2min,以3500r/min离心5min,取出备用。
2、净化:
吸取上清液5ml,转入已活化平衡的固相萃取柱中,控制1滴/s的流速,待样液进入萃取小柱的吸附层后,依次用5ml甲醇溶液、5ml甲醇进行淋洗,弃去淋洗液。最后用5ml氨化甲醇进行洗脱并收集,重复1次。将洗脱液旋转蒸发至近干,用2ml乙腈溶液溶解定容,经0.45um滤膜过滤后,待测。
3、色谱条件:
色谱柱:亲水柱,150mm*4.6mm,5um
流动相:乙腈—水,梯度洗脱,梯度表如下:
流速:1.0ml/min
柱温:30℃
波长:205nm
进样量:10ul
4、色谱图:
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